المجلة العلمية لجامعة الملك فيصل
العلوم الأساسية والتطبيقية
المجلة العلمية لجامعة الملك فيصل / العلوم الأساسية والتطبيقية
تنقية إنزيم البروتييز القاعدي من مخلف ريش الدواجن المتحلل بواسطة سلالة بكتيريا الباسيليس سابتيليس (B. Subtilis) المعدلة وراثيا
(خالد السيد الجيار ، طه إبراهيم زغلول، مدحت أبو جمعة هارون، هشام محمود سعيد)
الملخص
ينتج إنزيم البروتييز القاعدي من عملية التحلل الهوائي لمخلفات ريش الدواجن بواسطة بكتيريا الباسيليس المعدلة وراثيا في بيئة تحتوي على 2% من ريش الدواجن لمدة 48 ساعة. وقد كانت درجة الأس الهيدروجيني ودرجة الحرارة المثلى لنشاط هذا الإنزيم هما 7.2 من 45 درجة مئوية على الترتيب. وقد تم ترسيب الإنزيم من محلوله بواسطة كبريتات الأمونيوم (درجة تشبع 65%) متبوعا بعملية الديلزة (الميز الغشائي) عند أس هيدروجينى 7.2. ولقد تم تنقية الإنزيم باستخدام عمود التبادل الأيوني ثم عمود الترشيح سيفادكس جي 50 وتم تتبع مرور الإنزيم بقياس المحتوى البروتيني للراشح من الأعمدة عن طريق قياس درجة الامتصاص الضوئي على طول موجة ((280 نانوميتر. تم تنقية الإنزيم بعد عملية الدياليسيس 18.7 مرة وبحصيلة قدرها 91% وبعد التبادل الأيوني 56 مرة وبحصيلة 84.6% وبعد عمود الترشيح 75.5 مرة وبحصيلة 68.5%. باختبار عملية التنقية بالفصل الكهربي ظهر مكون واحد مما يدل على نقاوة الأنزيم بالمقارنة بالعينة قبل التنقية وقدر الوزن الجزيئي بـ 27 كيلو دالتون.
الكلمات المفتاحية: البكتريا المحللة للريش، تنقية البروتييز، الكيراتين.
المراجع